2020年江西医疗事业单位统考面试备考指导：检验（3）

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4.简述血红蛋白检测原理及方法学评价

答：(1)原理

①血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种Hb(如氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白(Hi)或其他衍生物)均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物——氰化高铁血红蛋白，其在540nm处有一吸收峰，用分光光度计测定该处的吸光度，经换算即可得到每升血液中的血红蛋白浓度，或通过制备的标准曲线查得血红蛋白浓度。

②十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS)测定法：血液中除SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS作用，生成SDS-Hb棕红色化合物，用分光光度计测定波峰538nm处吸光度，经换算可得到每升血液中的血红蛋白浓度。

(2)方法学评价

①氰化高铁血红蛋白法(HiCN3)：1966年被ICSH推荐为参考方法。该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。其致命的弱点是氰化钾(KCN)试剂有剧毒，使用管理不当可造成公害。

②十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS)：该法操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害等优点。但由于摩尔消光系数尚未最后确认，不能直接用吸光度计算Hb浓度，而且SDS试剂本身质量差异较大会影响检测结果。

(3)叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法：该法优点与HiCN测定法相似、最大吸收峰在542nm、显色快、结果稳定、试剂毒性仅为HiCN测定法的1/7，但仍存在公害问题。

(4)碱羟血红蛋白(AHD 575)测定法：该法试剂简单、呈色稳定、无公害、吸收峰在575nm、可用氯化血红素作为标准品。但仪器多采用540nm左右滤光板，限制了此法使用。

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